凝膠成像系統(tǒng)是一種集凝膠觀察、拍攝、分析于一體的先進設(shè)備,廣泛應用于分子生物學、生物工程和生物醫(yī)學等領(lǐng)域。該系統(tǒng)利用數(shù)碼相機或高分辨率CCD拍攝凝膠電泳后的圖像,通過計算機分析軟件實現(xiàn)樣品的定性和定量分析。隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)代凝膠成像系統(tǒng)已經(jīng)能夠覆蓋紫外激發(fā)、化學發(fā)光、多色熒光等多種成像模式,極大地拓寬了其應用范圍。
一、原理
凝膠成像系統(tǒng)的核心原理基于樣品對光的吸收差異。光源發(fā)出的光線照射到樣品上,不同樣品因成分和濃度的不同,對光的吸收量存在差異。通過拍攝這些差異形成的圖像,并利用軟件進行分析,可以得到樣品的光密度信息,進而推算出樣品的濃度或質(zhì)量。定性分析則依賴于樣品在電泳凝膠或其他載體上的遷移率差異,通過比較未知樣品與標準品在圖譜中的位置,確定未知樣品的成分和性質(zhì)。
二、使用方法
開機與預冷:首先開啟CCD電源進行預冷,約15分鐘后使用效果更佳。隨后依次打開電腦、暗箱電源,并運行分析軟件(如Image Lab)。
樣品準備與放置:將凝膠樣品放置在紫外透射儀的中心位置,確保照明燈自動打開后,樣品能均勻受光。
參數(shù)設(shè)置與成像:在軟件中設(shè)置曝光時間、增益等參數(shù),點擊運行實驗協(xié)議開始自動照相。成像結(jié)束后,從多張圖片中選擇最佳圖像進行后續(xù)處理。
圖像分析與保存:利用軟件中的圖像處理菜單進行亮度調(diào)整、優(yōu)化等處理,降低圖像本底噪聲,獲得清晰凝膠圖片。最后,將處理好的圖像保存或打印輸出。
三、常見故障及維修方法
顯示屏幕故障:如黑屏、顯示異常等,首先檢查電源連接是否正常。若電源正常,則可能是屏幕故障,需更換屏幕。
光源故障:光源不亮或亮度不足時,檢查燈管或電源是否損壞,必要時進行更換。
攝像頭故障:無法拍攝或圖像不清晰,可能是鏡頭污染或老化。使用干凈紙巾擦拭鏡頭,如無效則需更換攝像頭。
電路故障:如連接不上電腦或圖像無法傳輸,檢查接口是否松動,線路是否老化。確認接口緊密連接后,若問題依舊,需更換連接線路。
參數(shù)設(shè)置錯誤:檢查參數(shù)設(shè)置是否正確,如圖像亮度和對比度設(shè)置不當,會影響成像效果。根據(jù)需要進行調(diào)整。
圖像模糊或不清晰:調(diào)整對焦環(huán)以獲得清晰圖像,如鏡頭污染則進行清潔。
圖像色彩失真:檢查白平衡設(shè)置是否正確,必要時進行調(diào)整以糾正圖像色彩。
四、維護與保養(yǎng)
定期更換燈管:由于燈管隨使用時間增加會老化或損壞,建議定期更換以保證成像效果。
定期清潔:使用清潔布和清潔液對設(shè)備進行清潔,避免鏡頭模糊和其他故障發(fā)生。注意避免清洗劑流入設(shè)備內(nèi)部。
正確存放:長時間不使用設(shè)備時,注意存放環(huán)境避免陽光直射、高溫和潮濕。
定期校準:成像效果不理想時,可能需要進行設(shè)備校準以保證準確性。
綜上所述,凝膠成像系統(tǒng)作為分子生物學研究的重要工具,其原理基于樣品對光的吸收差異,通過精確的操作和維護可確保設(shè)備的正常運行和成像效果。在實際應用中,及時發(fā)現(xiàn)并解決故障對于保障實驗分析的準確性和可靠性至關(guān)重要。
五、容濟機電維修過的凝膠成像系統(tǒng)品牌和型號
1. Bio-Rad
(1)ChemiDoc系列:ChemiDoc MP,ChemiDoc XRS+
(2)GelDoc系列:GelDoc Go,GelDoc EZ
2.GE Healthcare (現(xiàn)Cytiva)
(1)Amersham Imager系列:Amersham Imager 600,Amersham Imager 680
(2)Typhoon系列:Typhoon FLA 9500,Typhoon FLA 7000
3.Syngene
(1)G系列:GChemi XRQ,GChemi XX6
(2)GeneSys系列:GeneSys
4.Thermo Fisher Scientific
(1)iBright Imaging Systems系列:iBright FL1000,iBright CL1500
(2)myECL Imager: 通用成像系統(tǒng)
5.Azure Biosystems
(1)Azure C系列:Azure C200,Azure C300,Azure C600
(2)Azure Sapphire: 多功能生物成像系統(tǒng)
6.LI-COR Biosciences
(1)Odyssey系列:Odyssey CLx,Odyssey Fc
(2)Pearl Trilogy: 定量成像系統(tǒng)
7.Analytik Jena
(1)UVP系列:UVP BioDoc-It2,UVP GelDoc-It2
(2)ChemStudio系列:ChemStudio,ChemStudio Touch
8.Vilber Lourmat
(1)Fusion FX系列:Fusion FX7,F(xiàn)usion FX6,
(3)Quantum系列:Quantum ST4,Quantum ST5
9.Eppendorf
(1)Eppendorf BioSpectrometer: 吸光度和熒光檢測系統(tǒng)
(2)Eppendorf Gel Imager: 凝膠成像系統(tǒng)
10.UVP (part of Analytik Jena)
(1)BioSpectrum Imaging System: 通用成像系統(tǒng)
(2)ChemiDoc-It2: 化學發(fā)光成像系統(tǒng)
11.ProteinSimple (part of Bio-Techne)
(1)FluorChem系列:FluorChem E,F(xiàn)luorChem R
(2)AlphaImager系列:AlphaImager HP,AlphaImager Mini
12.Gel Company
(1)OmniDOC系列:OmniDOC,OmniDOC MP
13.Uvitec
(1)UviLux系列:UviLux
(2)Alliance Q9 Advanced: 高靈敏度成像系統(tǒng)
14.Cleaver Scientific
(1)MicroDOC系列:MicroDOC Basic,MicroDOC Pro
(2)MultiDOC系列:MultiDOC-It2
15. Bio-Techne
(1)FluorChem系列:FluorChem M,F(xiàn)luorChem Q
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